ELISA b'riżultat ħażin?Segwina biex nagħżlu l-pjanċa korretta ta' Elisa.
L-għażla ta 'pjanċa ELISA adattata hija l-ewwel pass għal esperiment ELISA ta' suċċess, iżda ħafna nies jinjoraw dan. Meta n-nies jagħmlu esperimenti, ħafna drabi jqisu biss l-esperiment innifsu, iżda ma jafux li l-prodott spiss ikollu impatt kbir fuq l-esperiment. Għażla xierqa ta 'prodotti se tikkontribwixxi għas-suċċess tal-esperiment. Normalment inqisu l-fatturi li ġejjin meta nwettqu esperimenti ELISA:
1.Il-forma tal-qiegħ
Fil-preżent, il-manifatturi jiddisinjaw il-bjar tikkettati bl-enżimi bħala kolonni indipendenti, u jżidu b'mod xieraq id-distanza bejn il-bjar sabiex ikunu jistgħu jiġu separati b'mod indipendenti, u b'hekk jimminimizzaw il-kontaminazzjoni inkroċjata. Tipi differenti ta 'pjanċi Elisa għandhom forom differenti tal-qiegħ tal-bir. Hawn huma xi forom komuni tal-qiegħ tat-toqob:
Qiegħ ċatt: Il-qiegħ huwa orizzontali, imsejjaħ ukoll qiegħ F. Id-dawl mhux se jiġi devjat mill-qiegħ, li jista 'jitrażmetti d-dawl sa l-akbar punt. Uża għal esperimenti li jeħtieġu qiegħ tond għal viżibilità jew raġunijiet oħra.
Round Bottom: Magħruf ukoll bħala U-qiegħ, jipprovdi l-aħjar riżultati ta 'tindif u prestazzjoni ibrida, adattati għal applikazzjonijiet li jeħtieġu li jittestjaw is-sedimenti.
C-qiegħ: Jista 'jipprovdi effett ta' tindif tajjeb bejn il-qiegħ ċatt u l-qiegħ tond, filwaqt li jgħaqqad il-vantaġġi tal-qiegħ ċatt.
Qiegħ tal-Kon: Magħruf ukoll bħala V-bottom, huwa adattat għal kampjunar preċiż u ħażna ta 'kampjuni mikro għall-irkupru ottimali ta' volumi żgħar.
2. Il-kulur tal-pjanċa Elisa
Hemm tliet kuluri tal-pjanċa Elisa: trasparenti, iswed u abjad.
Il-maġġoranza tal-ELISA jagħżlu pjanċi trasparenti bħala materjali sperimentali. Pjanċi Elisa bojod u suwed ġeneralment jintużaw għall-iskoperta tal-luminixxenza. Il-pjanċa ELISA sewda nnifisha tassorbi d-dawl, għalhekk is-sinjal tagħha huwa aktar dgħajjef minn dak tal-pjanċa ELISA bajda. Il-pjanċi Elisa suwed ġeneralment jintużaw biex jiskopru dawl aktar b'saħħtu, bħal sejbien tal-fluworexxenza; għall-kuntrarju, pjanċi bojod Elisa jistgħu jintużaw għal skoperta ta 'dawl aktar dgħajfa, u ħafna drabi jintużaw għal kimiluminixxenza ġenerali u żvilupp tal-kulur tas-sottostrat (bħal luciferase doppju). analiżi tal-ġeni reporter).
3. Il-materjal tal-pjanċa Elisa
Materjali komuni huma polyethylene (PE), polypropylene (PP), polystyrene (PS), polyvinyl chloride (PVC) u polikarbonat (PC).
L-aktar materjali użati f'ELSIA huma polystyrene u polyvinyl chloride. Bord artab tal-klorur tal-polivinil huwa rqiq, jista 'jinqata', u l-prezz huwa baxx. L-iżvantaġġ huwa li l-finitura mhix tajba daqs il-bord tal-polistirene, u l-qiegħ tat-toqba mhux ċatt daqs il-polistirene. Iżda l-valur tal-isfond korrispondenti se jiżdied ukoll. Normalment, it-trattament tat-tilqim tal-jone jitwettaq fuq il-wiċċ tal-pjanċa ELISA, u gruppi funzjonali attivi bħal gruppi aldehyde, gruppi amino, u gruppi epossidiċi huma introdotti fil-wiċċ tal-polimeru biex itejbu l-prestazzjoni tal-wiċċ tas-sottostrat.
4. mekkaniżmi li jorbtu differenti
L-irbit effiċjenti tal-materjal tal-kisi mal-wiċċ tal-qiegħ tal-pjanċa huwa pass kruċjali fl-ELISA. Għalhekk, il-karatteristiċi strutturali u l-proprjetajiet kimiċi tas-sustanza li għandha tkun miksija għandhom jiġu analizzati bir-reqqa qabel l-esperiment biex tagħżel pjanċa Elisa xierqa. B'mod ġenerali, hemm diversi modi kif jorbot il-materjal tal-kisi mal-qiegħ tal-pjanċa: adsorbiment passiv, rbit kovalenti u qbid ta 'affinità.
Adsorbiment Passiv: Il-mekkaniżmu ta 'adsorbiment passiv huwa kumpless, u r-rabta bejn il-materjal tal-kisi u l-qiegħ tal-pjanċa tiddependi prinċipalment fuq forzi intermolekulari (forza ta' van der Waals) u bonds tal-idroġenu. Fil-biċċa l-kbira tal-ELISAs, it-twaħħil tas-sustanza tal-kisi mal-qiegħ tal-pjanċa titwettaq permezz ta 'adsorbiment passiv. Ġeneralment, ir-rabta bejn antiġeni ta 'piż molekulari medju u kbir (jew antikorpi) u l-qiegħ tal-pjanċa titwettaq permezz ta' adsorbiment passiv. Il-karatteristiċi idrofobiċi/idrofiliċi tal-wiċċ tal-qiegħ tal-pjanċa spiss jitqiesu meta tagħżel pjanċa Elisa. It-tabella li ġejja telenka l-ambitu tal-applikazzjoni u l-użu ta 'uċuħ ta' sottostrat idrofiliċi differenti:
idrofiliku | Prijorità vinkolanti | L-użu prinċipali |
- | Molekuli li fihom reġjuni idrofobiċi sinifikanti, bħal: lipidi, lipoproteini, proteini kbar | Antiġen ELISA, FlA, LIA |
plus | Bijomolekuli bi proprjetajiet idrofiliċi/idrofobiċi bħal: proteini medji għal kbar, immunoglobulini, albumina | Double Antibody Sandwich ELISA, Antigen ELISA |
plus plus | Bijomolekuli bi proprjetajiet idrofiliċi/idrofobiċi bħal: proteini żgħar għal kbar, immunoglobulini, albumina, LPS, proteini fosforilati, glikoproteini | Antikorp doppju ELISA, FIA, LIA |
plus plus plus | Glikoproteini, molekuli lipidi polari, fosfolipidi, kardjolipidi | Antiġen ELISA |
Qbid ta 'Affinità: Qbid ta' affinità huwa bbażat fuq l-irbit speċifiku ta 'makromolekuli ttikkettjati mar-riċetturi korrispondenti tagħhom. Makromolekuli tagged jistgħu jinkisbu jew permezz ta 'akkoppjar kimiku jew permezz ta' inġinerija ġenetika.
Il-karatteristiċi tal-Affinity Capture huma:
1.ispeċifiċità għolja
2.Jista 'jtejjeb il-proporzjon tas-sinjal għall-istorbju tar-riżultati tal-kejl
L-uċuħ tal-qiegħ sew aktar komuni huma: streptavidin (streptavidin) wiċċ miksi; nikil chelate (Nickel Chelate) wiċċ miksi u glutathione (Glutathione, GSH) wiċċ miksi.
3. Wiċċ Streptavidin: L-affinità għolja u l-ispeċifiċità ta 'streptavidin u biotin huma użati biex jiġu realizzati l-irbit tal-pjanċa tal-qiegħ mal-proteina miksija.
4. Wiċċ tal-kelat tan-nikil: Il-kelat tan-nikil huwa mwaħħal mal-wiċċ tal-polimeru biex jorbot il-proteini tal-fużjoni b'tikketti His (histidine).
5. Wiċċ tal-glutathione: Użu ta 'ispeċifiċità ta' enzima u substrat bejn glutathione u glutathione sulfhydryltransferase (GST) biex jinkiseb l-irbit tal-pjanċa tal-qiegħ mal-proteina tal-kisja.
Għaliex tagħżel pjanċa BKMAM Elisa?
Magħmul minn materjal tal-polistirene 100 fil-mija,
Adattat għall-kultura taċ-ċelluli aderenti,
Bażi ċatta, ħxuna uniformi u daqs uniformi għall-arbli ta 'reazzjoni,
Sterili b'pakkett individwali,
Kwalità għolja bi prezz tal-fabbrika.
